金耳是銀耳的近緣種，都有特定的伴生菌，只有在伴生菌存在的條件下，才能正常生長發(fā)育并完成生活史。但是金耳菌種獲得的方法顯著不同于銀耳，只有采用組織分離法，才能簡便地獲得適用于生產(chǎn)的有效菌種。采用孢子彈性分離法只能獲得純粹的金耳菌絲，采用耳木分離法在絕大多數(shù)情況下都是粗毛韌革菌絲，不能單獨使用，只有將金耳菌絲與其混合，才能得到較理想的生產(chǎn)用種，但在大多數(shù)情況下并不理想，故不適于一般生產(chǎn)者采用。而采用組織分離法得到的菌種，金耳菌絲和粗毛韌革菌絲均來源于同一組織塊，二者自然搭配合理，并具有很強的親合性。在這種搭配合理的菌種中，細長型的金耳菌絲占絕對優(yōu)勢，粗壯型粗毛韌革菌絲居于劣勢，此類菌種才具有較理想的結(jié)耳能力。
1.金耳菌絲的培養(yǎng) 金耳菌絲由金耳擔孢子或酵母狀分生孢子萌發(fā)而來，酵母狀分生孢子菌落初乳白色，后變淡褐色，在外觀上很難和銀耳的酵母狀分生孢子菌落相區(qū)別，較干燥，很少流動性，平貼在培養(yǎng)基表面。酵母狀分生孢子萌發(fā)時，菌落周圍常出現(xiàn)皺紋。在木屑培養(yǎng)基上，當溫濕度適宜時，黏稠狀的分生孢子菌落，能發(fā)芽形成潔白、細弱的金耳菌絲。菌絲細而短，長度很少超過5mm，透明無色，平伏于培養(yǎng)基表面，極少有豎立的氣生菌絲。此種菌絲移植后，極易變成酵母狀分生孢子。金耳菌絲與韌革菌的菌絲生長在一起時，可形成短而密的氣生菌絲，白色或淡黃色。金耳菌絲在瓊脂斜面培養(yǎng)基上生長緩慢，僅限于接種塊很小的局部范圍內(nèi)，用于接種原種時，必須用有白色和淡黃色菌絲團接種才能成功。有效菌種能在固體培養(yǎng)基的表面形成膠質(zhì)的腦狀金耳原基。
2.韌革菌絲的培養(yǎng) 韌革菌絲在生長初期，菌絲疏松，呈綿毛狀，白色，很快轉(zhuǎn)變成黃色或橙黃色，后期或經(jīng)多次移植色素變淺，味芳香或無味。隨培養(yǎng)時間延長，呈厚氈狀，革質(zhì)而具韌性，能分泌金黃色液體。故菌齡較長的母種，很難切割。菌絲有鎖狀連合，在固體培養(yǎng)基上，很容易產(chǎn)生淺盤狀、貝殼狀或不規(guī)則形的小子實體，邊緣有粗短的氈毛。
以上培養(yǎng)基中氮素不能加得過多，否則粗毛韌革菌絲生長旺盛，形成無效菌種。培養(yǎng)基pH值均為5.5～6.5，然后分裝于試管或錐形燒瓶內(nèi)，按常規(guī)進行高壓滅菌和擺成斜面?zhèn)溆谩?/div>
2.分離方法
（1）孢子分離法 選野生或段木栽培的新鮮成熟金耳子實體，經(jīng)自然風干備用。分離前，用無菌水沖洗子實體，置無菌室自然風干，用手術(shù)刀將種耳切成2.5～3cm的小塊，穿掛在無菌金屬釣上，使耳瓣表面向下，懸掛在盛有培養(yǎng)基的錐形燒瓶中，塞好棉塞，于17～22℃室內(nèi)培養(yǎng)，待耳塊表面出現(xiàn)霜狀物，培養(yǎng)基表面能看到薄層孢子印時，在無菌條件下，取出金屬鉤及種耳，塞好棉塞，移到25℃恒溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。42小時后培養(yǎng)基表面形成乳白色黏稠狀的酵母狀分生孢子菌落（俗稱芽孢菌落）。繼續(xù)培養(yǎng)48小時，菌落增大，相互連接成不規(guī)則的芽孢菌落，顏色變?yōu)槲郯咨?。在芽孢菌落形成時，要盡快用接種環(huán)挑取少許芽孢，在斜面進行劃線接種，進行純化培養(yǎng)，可得金耳酵母狀分生孢子菌種（芽孢菌種）。將芽孢菌種與具親和性的毛韌革菌絲混合培養(yǎng)，在形成子實體原基后作原種使用。
（2）耳木分離法 截取一小段生長金耳的段木，切去子實體，用0.1%升汞液對段木進行表面消毒。然后用無菌操作法挑取耳基附近0.2～0.5cm的耳木組織，接種在斜面培養(yǎng)基上，在25℃左右培養(yǎng)。采用這種分離方法，通常只能得到革菌菌絲，難以分離到金耳菌絲，將其接種到木屑培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)，瓶內(nèi)長滿濃密的革菌菌絲，常分泌黃色的液體，然后在基質(zhì)表面和瓶壁上形成邊緣反卷，呈厚氈狀、貝殼狀、淺盤狀或近似覆瓦狀的棕紅色革菌子實體。革菌也可從菌種瓶的基質(zhì)中進行分離。在原種瓶的中心部位，挑取豆粒大白色菌絲塊，接種到斜面上，用切割菌絲前端的方法，經(jīng)2～4次純化培養(yǎng)，可得到革菌的純菌種。接種到木屑培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)20天可滿瓶，一個月后可在瓶內(nèi)形成子實體。
（3）組織分離法 野生或人工栽培的金耳子實體都可以作為分離材料，所選種耳要求大小適當，色澤正常，無病蟲害，尤以幼耳為佳。金耳子實體未開瓣成團狀的幼耳內(nèi)部組織充實，且生活力旺盛。種耳用鮮耳或干耳均可，若用干耳分離，應(yīng)放在水中浸透，取出晾干表面水分，再用75%酒精或0.1%升汞液進行表面滅菌，用手剝開或切開后，挖取金耳組織塊進行分離。金耳子實體的外層黃色部分為金耳菌絲，內(nèi)層淺黃色部分為毛韌革菌菌絲，其交接處往往兩種菌絲相互穿插共生，分離時，應(yīng)從內(nèi)外層交接處挖取黃豆大小一塊組織，接種到斜面培養(yǎng)基的中央。然后將試管置18～25℃下培養(yǎng)，24小時后，種塊上菌絲萌發(fā)，2天后菌絲開始在斜面上生長。菌絲初期白色，漸變?yōu)榈S色或黃棕色，多數(shù)菌絲可憑肉眼辨認到粗細長短不同的形態(tài)。4～5天后有色素分泌，7～10天菌絲在斜面長滿，交織成韌性的氈狀層，周圍有黃白棕菌斑，即簇生的芽孢子堆。菌絲長到一定階段，可在其表面或試管邊緣形成豆粒大的黃白色、橙黃色或橙色的膠質(zhì)小子實體。通常培養(yǎng)7～10天，當菌絲在斜面長滿后，即可作母種使用。用組織分離法培養(yǎng)的母種含有兩種菌絲，不需要再進行混合培養(yǎng)。
以上三種分離方法，最簡便有效的是組織分離法，是目前金耳菌種分離的常用方法。
（四）原種、栽培種制作
原種、栽培種制作同常規(guī)。
二、培養(yǎng)料配制
（一）參考配方
金耳適用闊葉樹木屑、棉籽殼、玉米芯等多種原料栽培，可選用以下配方。
1.棉籽殼78%，麥麩15%，玉米粉7%。
2.棉籽殼72%，玉米芯20%，麥麩7%，石膏粉1%。
3.木屑48%，棉殼30 %，麥麩10%，米糠10%，糖1%，石膏粉1%。
4.玉米芯68%，米糠30%，石膏粉2%。
5.闊葉樹雜木屑78%、米糠或麩皮20%、白糖1%。
6.雜木屑70%、麩皮20%、玉米粉5%、豆稈粉1%、蔗糖1%、石膏粉1%。
（二）原料處理
玉米芯粉碎成花生粒大小，以上配方中，棉籽殼、玉米芯在配料前應(yīng)進行預(yù)濕，最后調(diào)含水量為60%，pH自然。
三、裝瓶（袋）、滅菌
（一）裝瓶 用500ml廣口瓶裝料，裝料深度在壓實后至瓶肩處，整平料面，用錐形木棒在培養(yǎng)料中間打一接種孔，孔徑1.2cm，深1.5cm，用一層12cm×12cm薄膜封口，薄膜中央事先開直徑2cm的孔，與培養(yǎng)料接種穴相對準，其上面用同樣大小的牛皮紙封蓋并扎緊。
（二）裝袋 選用17cm×50cm聚丙烯或聚乙烯塑料袋裝料。按常規(guī)用高壓或常壓滅菌。冷卻至30℃以下接種。
四、接種
（一）瓶栽 按常規(guī)無菌操作，用鑷夾取栽培種瓶內(nèi)一小塊金耳子實體和一小塊下方的菌絲塊，從塑料膜孔中投入培養(yǎng)料的接種穴內(nèi)即可。如不投入到接種穴內(nèi)，則接種成功率大為降低。
（二）袋栽 當袋料冷卻至28℃左右時打孔接種。每個料袋打孔7～9個，孔的直徑為1.5～2cm，深度約6.5cm，接種時孔穴底部先接入一塊粗毛韌革菌絲的混合木屑菌塊，然后在離穴口約1.5～2cm深處再接入一塊金耳菌絲與木屑菌種塊，最后在其上投放金耳耳塊，耳塊大小約1cm2，金耳子實體碎屑也應(yīng)接入。接好種后，貼上專用封口塑料薄膜（具有一定的透氣性），將接種完畢的菌棒搬入培養(yǎng)室（房）培養(yǎng)。
五、發(fā)菌管理
（一）瓶栽
接種后置于22～25℃培養(yǎng)室的地面或上架培養(yǎng)，保持室內(nèi)空氣流通，經(jīng)20～25天，菌絲在瓶內(nèi)長滿。在菌絲滿瓶后10天左右，料面產(chǎn)生白色間雜橙黃色菌膜，并有黃色分泌物，在接種塊上很快形成腦狀子實體原基。此時，為促進子實體繼續(xù)分化，應(yīng)將瓶口覆蓋物升高2cm左右，以增加氧氣供應(yīng)。隨著原基進一步增大，應(yīng)揭去瓶口覆蓋物，換上用報紙做的套筒（或用塑料袋），高約5cm，筒壁上可適當留幾個通氣孔，然后向紙?zhí)淄矅娝３譂駶?，此時室溫應(yīng)維持在18～24℃，溫度不宜超過28℃。
（二）袋栽
金耳屬于中偏低溫型類，菌絲生長速度快，呼吸作用比較強，所以在栽培管理中應(yīng)密切注意溫度變化和培養(yǎng)室的通風換氣。本階段的管理主要采取以下措施。
1.溫度調(diào)節(jié) 金耳菌絲生長的最適溫度為16～20℃，溫度略低于最適溫度有利于金耳菌絲生長，并可適當控制粗毛韌革菌絲生長，從而可以促進金耳子實體的形成，子實體形成后，溫度以18～24℃生長最好，溫度過低生長緩慢。當室溫10～15℃時，要做好保溫工作；低于10℃，即需要加強保溫或升溫；高于25℃，需采取降溫措施。
2.通風換氣 培養(yǎng)室的通風換氣十分必要，一方面可以促進菌絲生長；另一方面可以有效地抑制雜菌滋生。氣溫較高的天氣，要在早晚通風，氣溫較低時，可以在中午時通風。每天通風2次，每次約30分鐘。
3.濕度調(diào)節(jié) 袋內(nèi)封閉培養(yǎng)菌絲階段，由于封口薄膜具有既能適量透氣、又能保持水分的作用，一般情況下不存在培養(yǎng)室濕度調(diào)節(jié)問題。為了防止雜菌生長以及培養(yǎng)室干凈，相對濕度宜控制在80%以上。
4.光照控制 金耳的人工栽培常接種耳塊作菌種，不存在利用弱光照射誘導(dǎo)子實體原基發(fā)生的問題。在黑暗條件下不僅有利于菌絲生長，而且耳塊也能愈合，并能正常生長發(fā)育，故需遮光培養(yǎng)，忌強光直射。
5.病蟲害防治 發(fā)生病蟲害時，按常規(guī)方法對癥下藥加以處理。為保持培養(yǎng)室空氣清潔、有效地控制雜菌滋生，培養(yǎng)室要進行定期消毒。
六、出耳管理
（一）瓶栽
當瓶內(nèi)子實體長到4～5cm大小時，不要急于去掉紙?zhí)?，可將紙?zhí)自俅紊撸褂锥陟o風、多氧、適濕（80%～85%）、適溫（18～24℃）的穩(wěn)定環(huán)境下分化長大。子實體已長到瓶口大小時，去掉紙?zhí)?，在地面、空中每天噴?～3次，使相對濕度達90%，并開大門窗，加強通風量和光照度，在散射光作用下加速轉(zhuǎn)色（圖7-2-1）。
（二）袋栽
當金耳子實體原基發(fā)育長大到一定程度時，就要起膜、割袋、保濕，其具體措施如下。
1.掀膜、割袋 菌種耳塊定植后，隨菌絲的生長，耳塊表面的損傷也逐漸愈合、長大。當金耳子實體伸出孔穴時，就要掀起封口薄膜。覆蓋一層干凈或滅過菌的報紙保濕遮光。金耳子實體在孔內(nèi)繼續(xù)生長受阻時，就要進行割袋處理。割袋方法是：在接種孔口的周圍，用利刀（手術(shù)刀）割去一圈塑料袋的薄膜，割圈直徑4～5cm。
2.溫度調(diào)節(jié) 保持室溫20～25℃。超過30℃子實體停止發(fā)育，而且還易發(fā)生爛耳；溫度過低，子實體發(fā)育遲緩，幼耳萎縮，生長不良。
3.濕度控制 出耳的管理，最關(guān)鍵就是濕度的調(diào)節(jié)。濕度高易長雜菌，引起感染性爛耳；濕度過低不利于子實體生長，并可引起子實體表面脫水，難以轉(zhuǎn)色。出耳期，要求空氣相對濕度80%～90%，可以在報紙上再蓋地膜，也可以向報紙輕噴細水。晴天多噴，陰雨天少噴甚至停噴，噴水要成細霧狀，忌噴重水，也不能向子實體直接噴水，水要干凈，最好用冷開水。
4.通風換氣 隨著子實體不斷長大，要逐漸增加通風量，延長換氣時間。起初每天2次，每次約40分鐘；以后每日2～3次，每次1小時以上。通風換氣一方面可促進金耳子實體迅速生長，另一方面能更有效地抑制雜菌生長。
5.黃水處理 人工栽培金耳，經(jīng)常出現(xiàn)黃水，呈水珠狀黃豆粒大小，不易蒸發(fā)干燥，如不及時處理，可能引起爛耳?？捎妹撝幟藁蛭芪杉纯?。
6.病蟲害防治 開放出耳，金耳子實體暴露于空氣中。與外界環(huán)境長時間直接接觸，而金耳菌絲抗力較差，容易發(fā)生病蟲害與雜菌污染。故培養(yǎng)室要定期噴灑一定濃度的來蘇爾、新潔爾滅等或甲醛蒸熏，能有效地控制雜菌污染，同時要慎防鼠害。本階段管理要求達到：金耳子實體逐漸長大，色鮮白色，呈腦狀，并有少量黃水。
七、轉(zhuǎn)色管理
從接種到轉(zhuǎn)色約50天，金耳子實體基本達到生理成熟，就可以進行轉(zhuǎn)色，轉(zhuǎn)色應(yīng)選晴天進行，方法是：揭去覆蓋物，打開培養(yǎng)室門窗，加大通風量并給予適當光照，此時可以直接向子實體噴細霧狀水以保持濕度。這樣3～5日就能轉(zhuǎn)為鮮橙黃色的金耳。
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