近幾年來,食用菌行業(yè)逐漸進(jìn)入專業(yè)戶規(guī)?;⒑献魃缫?guī)?;绕涫枪S化生產(chǎn)模式,開放式接種形式被盲目效仿應(yīng)用。由于接種季節(jié)的溫度和濕度,對(duì)自然空氣中飄附塵埃中的雜菌孢子和致病菌類細(xì)菌等有害病菌,在自然溫濕度條件下的繁殖密度、傳播、漂浮、生命力延續(xù),以及存活的活性影響效果,造成食用菌不同接種條件下,接種后的雜菌污染率呈現(xiàn)不穩(wěn)定狀態(tài),偶爾出現(xiàn)的小環(huán)境范圍的接種成品率接近箱式接種效果,而很多菇農(nóng)接種的染雜率在30%~80%左右,總平均成品率60%左右,嚴(yán)重影響規(guī)模產(chǎn)業(yè)投資效益,因此影響食用菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展速度和社會(huì)效益。
1.染雜隱患類型分析
1.1自然空氣含帶雜菌的染雜途徑及措施:常見食用菌的雜菌污染率比較高的季節(jié)溫度在18℃以上,以25℃以上氣溫條件下的污染率比較嚴(yán)重。根據(jù)觀察和大量栽培經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)證,中原地區(qū)從“清明”節(jié)令開始,隨著自然界中綠色植被發(fā)芽后的地面綠化,自然空氣濕度逐漸增加,空氣中的雜菌含量隨之增多。
如果選用徹底滅菌后的袋料進(jìn)行試驗(yàn),在30℃左右自然環(huán)境溫度條件下,不進(jìn)行任何消毒和防護(hù)措施,實(shí)驗(yàn)性打孔接入固體菌種,可以看到“全菌覆沒”,全部污染雜菌的現(xiàn)象,簡單的試驗(yàn)就可以說明自然空氣中含有多種雜菌和致病菌的自然現(xiàn)象。因此,規(guī)?;a(chǎn)反復(fù)驗(yàn)證,采用開放式接種的菌棒不污染雜菌的安全系數(shù),經(jīng)常在30%~85%左右徘徊。有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的栽培者,選擇偏低溫度時(shí)段的夜間、早上、下雨后、嚴(yán)格消毒的房間內(nèi)接種,也有偶爾出現(xiàn)95以上成菌率的,而偶遇的經(jīng)濟(jì)代價(jià)實(shí)在太大了。
解決方法是:進(jìn)行嚴(yán)格的接種環(huán)境封閉性嚴(yán)密消毒,不允許自然空氣自由流通。
1.2袋料表面攜帶雜菌的染雜途因素及措施:經(jīng)過消毒處理后的塑料栽培袋表面,仍然保留著表面原來粘附的微粒狀原料和塵埃,如果在自然環(huán)境中降溫和存放,就給空氣中漂浮的雜菌和病菌提供了溫度、濕度、營養(yǎng)兼?zhèn)涞募纳h(huán)境,而使袋料表面沉積相當(dāng)數(shù)量的雜菌孢子和致病菌,如果是在封閉的房間內(nèi),進(jìn)行開放式接種,產(chǎn)生的現(xiàn)象是:隨著接種后的袋料數(shù)量的增加,染雜菌袋料比率也在增多。這種現(xiàn)象的主要原因是袋料表面被壓在袋了堆垛之間的含雜菌灰塵,經(jīng)過接種過程,逐漸散發(fā)和釋放到接種場合,而被接入到接種的空穴里了。
解決的方法是:對(duì)滅菌后的袋料進(jìn)行氣霧消毒狀態(tài)下的封閉降溫。
1.3菌種攜帶雜菌的染雜因素及措施:菌種攜帶雜菌的因素,除了具有與袋料表面攜帶雜菌相同的現(xiàn)象外,還有封口棉塞外壁和其中呼吸的空氣、瓶蓋絲扣或扎口繩之間、以及菌種培養(yǎng)過程中選雜菌看不到的潛伏雜菌和病菌。例如中心打孔接種的菌種,或者使用低于22℃溫度培養(yǎng)的菌種中潛伏的中高溫類雜菌和致病菌。
解決方法有幾種:
(1)用24℃~26℃恒溫培養(yǎng)菌種。(2)接種之前,把菌種袋(瓶)放到殺菌溶液中浸透表面和棉塞,封閉表面和面塞內(nèi)的含雜空氣。(3)是仔細(xì)挑選優(yōu)質(zhì)純菌種,使用時(shí)仔細(xì)觀察,防止把含雜菌的菌種接入菌種穴。(4)嚴(yán)禁采用開放式接種方法制作菌種。(5)不用老化菌種和含水率偏高的菌種。(6)選用表面接種的菌種,接種時(shí)去除2cm表面老化菌種不用。
1.4人體活動(dòng)攜帶雜菌的染雜因素及措施:接種人員攜帶雜菌的因素包括:頭發(fā)和衣服中的自然空氣、呼出氣體和鞋襪攜帶的含雜菌病菌塵埃、進(jìn)入接種環(huán)境時(shí)隨身流入的自然空氣、人體皮膚表面攜帶的病菌等。
解決方法有:
(1)接種人員選用具有過濾雜菌效果的頭罩、口罩、塑料腳褲套、松緊口式工作服并經(jīng)過消毒,限制體內(nèi)和衣服中的自然空氣自由流通。(2)設(shè)置緩沖間,進(jìn)行衣物消毒和自然空氣流通的隔離。(3)在接種人員進(jìn)入接種環(huán)境時(shí),用消毒藥霧封閉進(jìn)口。
1.5接種環(huán)節(jié)常見染雜隱患及措施:
接種過程常見染雜隱患
(1)接種環(huán)境消毒不嚴(yán)格。
(2)人員隨便出進(jìn)引入大量自然空氣。
(3)接種操作程序不經(jīng)消毒。
(4)菌種、打孔錐隨便放置。
(5)接種的手不經(jīng)任何消毒措施,或經(jīng)過消毒后隨處觸摸(如接種的消毒后之手移動(dòng)袋料之后不經(jīng)消毒而直接拿菌種接種等)。
(6)采用“一抹凈”誤導(dǎo)消毒理念,忽略環(huán)境空氣含帶大量未經(jīng)消毒的自然空氣,在拔出打孔錐的瞬間已經(jīng)進(jìn)入菌種穴內(nèi)的污染雜菌隱患危害性。
(7)消毒的藥品或器械的實(shí)際消毒效果不確切,并無法驗(yàn)證。
解決方法:
設(shè)計(jì)“無菌化”接種操作程序:封閉接種環(huán)境;——采用95%酒精用于袋料接種穴表面消毒;——菌種和打孔錐固定放置到酒精消毒小毛巾的容器中;——接種的手每次拿菌種之前進(jìn)行一次酒精消毒,消過毒的手指不允許觸及菌種以外的任何部位;——接種場地配用臭氧發(fā)生器,對(duì)工作人員活動(dòng)和呼出的空氣進(jìn)行現(xiàn)場消毒(需要注意的是:設(shè)計(jì)專家提示,臭氧消毒方法產(chǎn)生實(shí)際效果的時(shí)間是60min左右之后)。
1.6發(fā)菌管理環(huán)節(jié)染雜因素分析:
開放式接種的發(fā)菌管理環(huán)境溫度,以22~25℃為適宜,濕度保持55%~75%為適宜。培養(yǎng)濕度和溫度過高條件下,容易在環(huán)境中產(chǎn)生濃厚的雜菌滋生條件,有經(jīng)驗(yàn)的管理員,進(jìn)入管理環(huán)境聞一下氣味就知道養(yǎng)菌環(huán)境是否有雜菌滋生。尤其是菌種穴直徑大于10cm以后,培養(yǎng)環(huán)境溫度高于25℃,用以造積溫成燒菌現(xiàn)象。輕度燒菌的菌絲由濃白色變成米黃色。燒菌后的菌穴中的菌絲抗病能力急劇下降,極易污染雜菌。特別是栽培菌棒采用套袋封口,配用75%酒精及其他消毒藥品含水量大于30%進(jìn)行消毒的,脫袋后容易產(chǎn)生菌種穴黑窩、流黃水、生蛆等現(xiàn)象。其中原因是,菌種表面吸收了消毒后的生于水分和接種環(huán)境中的致病菌,脫袋后又吸附大量自然環(huán)境溫度和濕度條件下的雜菌和病菌而導(dǎo)致。
解決方法:脫去外套袋時(shí),需要快速通風(fēng),讓菌種穴表面呈現(xiàn)偏干燥狀態(tài),不給后期污染雜菌和病菌提供滋生條件。
食用菌開放式接種的染雜隱患及防范措施,供參考。
2.綜合防止染雜措施及程序設(shè)計(jì)要點(diǎn)
以上分析表明,雜菌污染率升高的主要因素:
(1)是菌種攜帶。
(2)是袋料生產(chǎn)過程形成(如微孔和表面攜帶)。
(3)接種人員攜帶和釋放。
(4)是操作過程粗糙。
(5)是選用消毒藥品不當(dāng)。
(6)是管理方法和措施失控。
(7)是接種和養(yǎng)菌環(huán)境中的空氣中存在較多雜菌和病菌等等各種緣故。
(8)是缺乏食用菌應(yīng)用技術(shù)與“無菌化”概念的經(jīng)驗(yàn)。所有防止染雜因素和技術(shù)措施的配合,既需要對(duì)選用品種基本理論基礎(chǔ)的學(xué)習(xí)和了解,更需要較長時(shí)間的反復(fù)實(shí)踐的經(jīng)驗(yàn)積累。
所有染雜因素,都是栽培者既無法觀察,又無法檢測的模糊概念。實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用程序的設(shè)計(jì),是根據(jù)現(xiàn)實(shí)條件和選用措施的可操作性及可靠性的掌握為基礎(chǔ)。根據(jù)上述分析情況,設(shè)計(jì)的“開放式”接種的“無菌化”應(yīng)用生產(chǎn)管理程序如下:
(1)提前半天或一天“控濕”拌料——解決培養(yǎng)料中雜菌孢子不容易滅菌徹底問題。
(2)裝好的袋料浮水檢孔——解決原料粗糙,栽培袋微孔容易染雜問題。
(3)滅菌后趁熱封閉降溫——解決袋料表面攜帶含雜菌問題。
(4)塑料吊棚全封閉接種——解決大環(huán)境“無菌化”控制困難問題。
(5)吊棚(房間)進(jìn)口增加“緩沖間”——解決工作衣物消毒和人體帶入自然空氣消毒問題。
(6)藥霧降塵和封閉接種入口——解決人體攜帶自然空氣含帶雜菌問題。
(7)著裝頭帽、口罩(用開水津后擰干)、松緊口細(xì)布衣服、塑料袋套扎腳和褲口——解決人體攜帶和釋放雜菌問題。
(8)接種工作臺(tái)加放臭氧消毒機(jī)——解決接種環(huán)境中的剩余雜菌和病菌(30min以后的)積累問題。
(9)采用95%酒精消毒——解決接種穴消毒藥劑套袋后的剩余水分為雜菌提供菌種穴表面滋生問題。
(10)養(yǎng)菌環(huán)境用臭氧定時(shí)消毒——解決養(yǎng)菌環(huán)境滋生雜菌和病菌問題。
(11)注意事項(xiàng):①一個(gè)房間的空間容量的塑料吊棚,一次放入接種袋料數(shù)量參考6~7個(gè)人一次進(jìn)入接種時(shí)間不超過3h為準(zhǔn),因?yàn)榉忾]的接種環(huán)境中的氧氣供應(yīng)限制,最長不宜超過3.5h。②在房里開放接種,門口及其門邊縫隙需要用膠帶封閉。③接種人員應(yīng)具有健康身體,如果接種過程產(chǎn)生頭暈、氣短等不良反應(yīng)的人,護(hù)送出接種環(huán)境,即可恢復(fù)正常狀態(tài)。